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植物基因组DNA提取试剂盒图片
产品货号:
LA10995
中文名称:
植物基因组DNA提取试剂盒
英文名称:
Plant Genomic DNA Kit
产品规格:
50T|200T
发货周期:
1~3天
产品价格:
询价

本试剂盒采用高效、专一的吸附柱,特异性结合核酸分子,去除杂质,提取多种植物中的基因组DNA。提取的基因组DNA纯度高,片段大,质量稳定可靠。使用本试剂盒得到的DNA可适用于各种常规操作,包括酶切、PCR、文库构建、Southern杂交等实验。




组分50T200T
Buffer GPA40mL125mL
Buffer GPB30mL120mL
Buffer GPD13mL52mL
Buffer PW12mL50mL
Buffer EB12mL50mL
β-巯基乙醇800μL3mL
纯化套件(吸附柱+收集管)50套200套
说明书1份1份

保存:室温,有效期一年。


1.温度较低时,试剂盒中有的溶液可能产生沉淀,使用前在37℃水浴中加热,直至沉淀消失。
2.样品应避免反复冻融,否则会导致提取的DNA片段较小且提取量下降。
2.若缓冲液GPA或GPB中有沉淀,可在37℃水浴中重新溶解,摇匀后使用。
3.所有离心步骤均为使用台式离心机,室温下离心,速度为12000rpm(~13400×g)。


使用前请先在缓冲液GPD和漂洗液PW中加入无水乙醇,加入体积请参照瓶上的标签。
  • 取植物新鲜组织50~100mg或干重组织约30mg,在液氮中充分研磨成粉末,并转移至1.5mL的离心管中。
    注意:研磨是否充分,将会影响基因组DNA的得率。磨碎标准是在加入Buffer GPA后,在溶液中没有大的组织团块。
  • 加入600μL 65℃预热的Buffer GPA和12μL β-巯基乙醇。震荡混匀,置于65℃水浴25min,间或混匀。
    注意:如果需要去除RNA,可在水浴后加入2μL RNase A(100mg/ml)溶液(客户自备),振荡15sec,室温放置5min。
  • 加入等体积的氯仿,充分混匀,12000rpm离心5min。吸取上层水相至一个干净的1.5mL离心管中。
    注意:若提取富含多酚或淀粉的植物组织,可在第3步前,用酚:氯仿/1:1进行等体积抽提。
  • 加入等体积Buffer GPB,颠倒混匀3~5次,再加等体积的无水乙醇,充分混匀后用移液器将其全部加入到吸附柱G1中(吸附柱放入收集管中),室温静置2min。12000rpm离心1min,倒掉收集管中废液,将吸附柱G1放入收集管中。
  • 向吸附柱G1中加入500μL Buffer GPD(使用前请先检査是否已加入无水乙醇),12000rpm离心1min,倒掉收集管中废液,将吸附柱G1放入收集管中。
  • 向吸附柱G1中加入500μL Buffer PW(使用前请先检査是否已加入无水乙醇),12000rpm离心1min,倒掉收集管中废液,将吸附柱G1放入收集管中。
  • 重复操作步骤6。
  • 将吸附柱G1放回收集管中,12000rpm离心2min,倒掉废液。将吸附柱G1置于室温放置数分钟,以彻底晾干吸附材料中残余的漂洗液。
    注意:这一步的目的是将吸附柱中残余的漂洗液去除,漂洗液中乙醇的残留会影响后续的酶反应(酶切、PCR等)实验。
  • 将吸附柱G1转入一个干净的离心管中,向吸附膜的中间部位悬空滴加50~200μL洗脱缓冲液EB,室温放置2~5min,12000rpm离心1min,将溶液收集到离心管中。
    注意:洗脱缓冲液体积不应少于50μL,体积过小影响回收效率。为増加基因组DNA的得率,可将离心得到的溶液再加入吸附柱G1中,室温放置2min,12000rpm离心1min。洗脱液的pH值对于洗脱效率有很大影响。若用ddH2O做洗脱液应保证其pH值在7.0~8.5范围内,pH值低于7.0会降低洗脱效率;且DNA产物应保存在-20℃,以防DNA降解。

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